试剂准备區(qū):扩增试剂的制备、包装和贮存
样品处理(lǐ)區(qū):样品注册、子包;核酸提取、保存和加载
扩增产物(wù)分(fēn)析區(qū):扩增产物(wù)的测定、结果分(fēn)析、注册和报告
预扩增區(qū)和后扩增區(qū)应严格分(fēn)开,并且必须使用(yòng)不同的房间。最好在两个區(qū)域之间有(yǒu)一定的间隔。
使用(yòng)商(shāng)业试剂盒在样品处理(lǐ)區(qū)域中制备小(xiǎo)试剂
样品处理(lǐ)區(qū)域和试剂制备區(qū)域可(kě)以位于同一房间,只要满足以下操作和清洁要求:
在生物(wù)安全柜中操作;
每个实验者、实验组使用(yòng)各自的试剂和消耗品;
将含有(yǒu)污染物(wù)的容器密封并使用(yòng)一次;
实验前后对操作區(qū)域和共用(yòng)设备进行有(yǒu)效清洁和消毒。
1、主要结构:
主體(tǐ)是彩钢板、铝合金型材。房间的所有(yǒu)内角、正角均由铝合金50圆形铝制成,这解决了容易污染的问题、灰尘、难以清洁等问题。结构牢固,線(xiàn)条简洁,外形美观,密封性好。
2、标准三區(qū)分(fēn)离和气压调节:
PCR过程分(fēn)為(wèi)试剂制剂。在三个独立的实验區(qū)中进行、样品制备和PCR扩增测定。整个地區(qū)都有(yǒu)一个整體(tǐ)缓冲走廊。每个独立的实验區(qū)都设有(yǒu)一个缓冲區(qū),每个區(qū)域都受气压调节,从而在整个PCR实验过程中保护试剂和标本免受气溶胶污染,减少了对人和环境的扩增产物(wù)的污染。
缓冲器I可(kě)以打开,缓冲器II的排气扇和PCR放大區(qū)域在外面排出,可(kě)调节风量的出风口安装在实验區(qū)和每扇门的外壁上,空气通风在室内通过回风口。。3、消毒:
紫外灯安装在三个实验區(qū)域和三个缓冲區(qū)的顶部,并在传输窗口内进行消毒。
在试剂制备區(qū)域和样品制备區(qū)域中还提供移动的紫外灯,以对实验台进行部分(fēn)消毒。
4、机械链不锈钢传递窗:
试剂和样品通过机械互锁不锈钢(不建议用(yòng)于電(diàn)子联锁)进行交付,以确保试剂和样品在转移过程中不被污染(个人分(fēn)流)
5、地
建议使用(yòng)PVC盘绕地板或自流动地板以获得良好的地面。易于清洁和耐腐蚀。水磨石地板也可(kě)以无条件地使用(yòng),或者大块瓷砖(至少800 mm x 800 mm)接缝需要小(xiǎo)于2 mm。
6、照明
灯具应清洁光滑,可(kě)达到易于清洁的特点、无尘。
注意施工过程
●标准化的安装流程和全面的服務(wù)流程
●严格遵循科(kē)學(xué)设计的安装流程。
●安装前,需要确定以下安装条件,如:電(diàn)源電(diàn)压,電(diàn)源線(xiàn)位置,電(diàn)话网線(xiàn)入口位置,进水压力,最小(xiǎo)安装空间,地面,通风孔、进水管和下水管位置等。理(lǐ)想的空间大小(xiǎo)和通风口的大小(xiǎo)。
>>>设计要点<<<
PCR实验室可(kě)以是分(fēn)散形式或组合形式。完成一组PCR实验,通常通过试剂制备、样品处理(lǐ)、核酸扩增和产物(wù)分(fēn)析四个实验步骤,如果实验过程需要,还应增加样品破碎过程。
一个、分(fēn)散形成PCR实验室
所谓的分(fēn)布式PCR实验室是指完成上述实验过程的实验室彼此相距很(hěn)遠(yuǎn)并且处于分(fēn)布式排列。对于这种类型的PCR实验室,不需要特殊条件,因為(wèi)实验不容易相互干扰。
两个、组合形成PCR实验室
所谓组合形式PCR实验室是指完成PCR的四个实验过程的实验室彼此相邻排列以形成独立实验區(qū)域的形式。对于组合式PCR实验室,由于每个实验的集中安排,容易引起相互干扰,因此对整體(tǐ)布局和屏障系统有(yǒu)一定的要求。每个舱室在入口处设有(yǒu)缓冲室,以减少室内和室外空气交换。
1.实验室空调通风系统设计和压力控制PCR实验室没有(yǒu)严格的纯化要求,但為(wèi)了避免各个实验區(qū)域之间存在交叉污染的可(kě)能(néng)性,建议使用(yòng)全流量全流量气流组织。同时,要严格控制排气的比例為(wèi)、,以保证每个实验區(qū)的压力要求。
2.预防和控制污染
PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实践中,以下类型的污染是常见的:扩增产物(wù)的污染;天然基因组DNA的污染;试剂污染和试样之间的污染。由于污染发生,必须停止实验直到找到污染源,并且必须丢弃实验结果并且需要重复实验。因此,在污染发生后,在实验室周围浪费寻找污染源不仅浪费时间和麻烦,而且浪费人力和资源。因此,為(wèi)避免污染,应首先进行预防,而不是排除。
PCR实验室必不可(kě)少的严格管理(lǐ)
(1)严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进入或离开实验室,必要时设置进出整个实验區(qū)的独立通道和门;
(2)尽量减少实验區(qū)域内不必要的移动,以减少交叉污染的可(kě)能(néng)性
(3)扩增产物(wù)分(fēn)析區(qū)是扩增产物(wù)污染的最重要来源。废液不能(néng)倾倒在实验室中。必须将其浸入消毒剂溶液中并丢弃在遠(yuǎn)离实验室的地方。使用(yòng)过的尖端是一次性的。材料也应在消毒液中浸泡和消毒处理(lǐ),如焚烧;
(4)扩增产物(wù)分(fēn)析區(qū)可(kě)能(néng)存在一些基因突变和有(yǒu)毒物(wù)质,应特别注意实验人员的安全防护。
3.完整的实验室配套设施完整的实验室配套设施是确保实验工作的必要条件。设备和仪器应根据每个实验室的实验内容配备,如超洁净工作台、离心机、取样器等。