一、无菌室的级别：

       根据空气洁净度的不同，无菌室可(kě)分(fēn)為(wèi)哪几个级别？

       一般情况下，无菌室的等级有(yǒu)百级，千级，万级，十万级，百万级等等。

       净化等级一般分(fēn)為(wèi)100级、1000级、10000级、100000级，现在2010年版的已经不用(yòng)这个叫法了，分(fēn)為(wèi)ABCD级别，分(fēn)别相对应于98版的几个级别，通过检测區(qū)域内的尘埃粒子数、浮游菌数、沉降菌数评价净化级别，各个级别有(yǒu)不同的要求，净化等级分(fēn)静态、动态两种。

       二、无菌室设计建设要点：  

       无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢，便于清洗。工作台的台面应该处于水平状态。无菌室和缓冲间都装有(yǒu)紫外線(xiàn)灯，无菌室的紫外線(xiàn)灯距离工作台面1米。工作人员进入无菌室应穿灭过菌的服装，戴帽子。

       当前无菌室多(duō)存在于微生物(wù)工厂，一般实验室则使用(yòng)超净台。超净台其主要功能(néng)是利用(yòng)空气层流装置排除工作台面上部包括微生物(wù)在内的各种微小(xiǎo)尘埃。通过電(diàn)动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。而且在接近外部的一方有(yǒu)一道高速流动的气帘防止外部带菌空气进入。在条件较困难的地方，也可(kě)以用(yòng)木(mù制无菌箱代替超净台。

      无菌箱结构简单，便于移动，箱正面开有(yǒu)两个洞，不操作时用(yòng)推拉式小(xiǎo)门挡住，操作时可(kě)以将双臂伸进去。正面上部装有(yǒu)玻璃，便于在内部操作，箱内部装有(yǒu)紫外線(xiàn)灯，从侧面小(xiǎo)门可(kě)以放进去器具和菌种等。

      三、无菌室操作规范

       1.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物(wù)，以防污染。

       2.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用(yòng)。

       3.无菌室应备有(yǒu)工作浓度的消毒液，如5%的甲酚溶液，70%的酒精，0.1%的新(xīn)洁尔灭溶液，等等。

       4.无菌室应定期用(yòng)适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。

       5.需要带入无菌室使用(yòng)的仪器，器械，平皿等一切物(wù)品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。

       6.无菌室使用(yòng)前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分(fēn)钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理(lǐ)无菌室，再用(yòng)紫外灯辐照灭菌20分(fēn)钟。

       7.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分(fēn)别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15mL，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小(xiǎo)时，证明无菌后，取平板3～5个，分(fēn)别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分(fēn)钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小(xiǎo)时，取出检查。100级洁净區(qū)平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求為(wèi)止。

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